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豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌PCR檢測(cè)試劑盒研制闡述

發(fā)布時(shí)間:2020/11/26 10:48:00      閱讀次數(shù):1358

 

 

發(fā)布時(shí)間 : 2020-06-04 閱讀次數(shù) : 137

 

根據(jù)GenBank中豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌apxⅣ A基因序列,設(shè)計(jì)了1對(duì)引物,通過(guò)對(duì)PCR反應(yīng)條件進(jìn)行優(yōu)化,研制了檢測(cè)豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌的PCR試劑盒.該試劑盒擴(kuò)增的陽(yáng)性條帶為600 bp,特異性與敏感性結(jié)果顯示,該P(yáng)CR檢測(cè)試劑盒的最低核酸檢測(cè)量為50 CFU/mL,而對(duì)金黃色葡萄球菌 鏈球菌 多殺性巴氏桿菌 鼠傷寒沙門氏菌 副豬嗜血桿菌 大腸桿菌的擴(kuò)增結(jié)果均為陰性.-20℃至少可保存12個(gè)月,且重復(fù)性良好.應(yīng)用該P(yáng)CR試劑盒對(duì)41份臨床樣本進(jìn)行了檢測(cè),其PCR檢測(cè)結(jié)果與細(xì)菌學(xué)檢測(cè)結(jié)果相一致.結(jié)果表明,豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌PCR檢測(cè)試劑盒能夠?qū)PP臨床樣品進(jìn)行快捷 靈敏 準(zhǔn)確的檢測(cè).
 
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2.優(yōu)化的緩沖液可增強(qiáng)特異性并減少引物二聚體的形成.
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